浅谈空气微生物的检验技术
(资料图片仅供参考)
摘要:目的: 探讨空气微生物的检验措施。方法: 通过实验室的科学检验,掌握空气微生物的属性与致病因素,总结出系统的检验措施和相应的控制方法。结论: 科学准确的掌握空气微生物的检验措施,把握致病规律,才能为有效的控制和预防相关疾病提供可靠的依据。
关键词:空气微生物;检验;细菌
【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602(2014)01-0188-01
存在于空气中的微生物。是主要的空中浮游生物。对较干燥环境和对紫外线具有抗性的种类,主要有附着于尘埃上的从地面飞起的球菌属(包括八叠球菌属在内的好氧菌);形成孢子的好氧性杆菌(如枯草芽孢杆菌);色串孢属等野生酵母;青霉等霉菌的孢子等。下面将空气微生物的检验技术分析汇报如下。
1各类微生物的基本检验程序
空气中微生物检验主要分为细菌、病毒、真菌、立克次体类的检验。
2几种常见空气微生物采样
方法及细菌菌落总数测定
2.1Andersen采样器
2.1.1构造: 新型采样器是Andersenl958年研制而成由采样胶体、流量剂、压力计和抽气泵组成。
2.1.2特点: ①采集空气微粒范围宽;
②采样效率高;
③生物失活率低;
④敏感性高;
⑤操作简便;
⑥应用范围广,常用于空气致病微生物的采集。
2.1.3操作步骤:①消毒
采样器的消毒方法有3种:75%酒精;高压蒸气灭菌:用于采样头的消毒;环氧乙烷消毒。
②有关参数设定:
流量,28.3L/min,固定流量抽吸空气,流量准确与否是该采样器操作的关键所在,流量不准或未经校正的采样器不可使用。真空度,0.1354kPa。若真空度不够,可影响气流速度,从而影响采样效率。
③平皿制备
采样用培养基平皿要提前一天准备好,每个样品需6个平皿,预置37℃18~24h培养,无细菌生长,即可用于采样。
④采样高度
根据采样目的而定,一般置于人的呼吸带高度,大约1.0~1.5m左右,并且采样人员应远离采样头。采集时间要根据现场微生物污染程度而定。
⑤培养
打开采样器,盖上平皿盖。细菌培养37℃培养48h,真菌培养28℃培养72h。
⑥菌落计数:计数方法可以采用分段计数及菌落计数器进行。一般以菌落形成单位表示。一般每个平皿最多不超过250cfu。
2.2THK-201型采样器
2.2.1构造: THK-201型采样器是在JWL型采样器基础上改进而成。基本构成包括:采样头、流量计、抽气泵、可调电路。
2.2.2特性: ①采样头的筛孔(隙)为可调式;
②捕获率高;
③适应范围广,在不同环境通过调节筛孔来采集不同大小的微粒提高了其应用范围,可采集细菌、真菌、病毒、立克次体、原生动物、植物、花粉、藻类等,适用于环保、生物工程、医疗卫生、卫生防疫、工农牧业、食品加工业等;
④功能齐全。
2.2.3操作步骤: ①平板制备
制作平皿培养基应注意厚薄均匀,保证无菌。琼脂浓度要较其他采样方法略高一点(≤2.4%),过高过低均会影响采样效率。
②仪器相关参数
电源,工作电压:220V;转速,选档,定时范围;流量,5~35L/min;采样筛头,最小狭缝≤20μm,最大500μm。根据需要分级调节,使用时要对环境中微生物有一个大略估计,以便进行筛孔调节。
③培养
方法和时间同Andersen采样器。
2.3自然沉降采样法
2.3.1特点:①简便易操作,不需特殊采样器,只需采样的平皿培养基。
②能反映沉降细菌的数量,特别是医院的烧伤外科、手术室、人流室等一些相对空气流动性不大,但空气中微生物在静止时下落到物表,造成污染,更严重的造成院内感染。
③可用于粗略反映空气中细菌污染状况。
④此法不足之处:用下落菌推算空气中悬浮菌量,有推理上的错误。比较公认的是奥梅梁斯基的公式来推算浓度,他认为在100cm2培养基表面,5min内能落下约10L空气中所含菌量。标准细菌种类较少。采样条件要保证无菌状态,十分难以控制[1]。
2.3.2自然沉降法采样的操作步骤:①培养基的制备:
一般采用9cm直径平皿制作。细菌用普通营养琼脂,真菌用沙堡培养基或察氏培养基。制备好的平板应置35~37℃预培养18~24h,选无菌生长的平皿用于采样。
②选择检测点:
室内面积≤30m2沿一对角线上取三点,即中间一点两端各距墙1m处各取一点,室内面积>30m2,设东、南、西、北、中5个点,各点均距墙1m,采样高度0.8~1.5m。若使用采样器监测时,采样器应距地面高度33cm,离门窗及人员流动1m以上,且采样器与采样者要保持一定距离(50cm),防止采样者自身细菌被吸入采样器而影响检测结果。室外采样要根据该地区气象、交通、大气污染程度、建筑物布局、有无树林等进行合理选点,选点数不定,每个点采样高度1.5m以上。可以一个点同时放置两个平皿,以平均菌落数代表该点的菌落数。
③暴露平血时间:
原则是保证客观反映采样点情况,采样后平皿中生长的菌落数要便于准确计数,太多以至于无法计数将造成较大偏差,一般洁净室内暴皿时间可在5~30min,一般室内较洁净的地方,多采用暴皿5min即可。
④培养:
细菌样品35~37℃培养48h,真菌样品置28℃培养72h。
2.4JWL型采样器
2.4.1结构: 由采样头、流量计、抽气泵、电源电路4部分构成。
2.4.2特点: ①采样的平皿可以转动,使平皿上菌落均匀分布;
②交一直流两用,应用简便;
③自动按时采样,可采细菌和病毒;
④但对空气中占大多数的粒子捕获率低。
2.4.3操作步骤: ①平皿制备
细菌用普通琼脂,真菌用选择性培养基(如察氏培养基)。平皿要求厚薄均匀,表面水平,加培养基量4.5ml,琼脂浓度1.8%~2.4%为宜。
②采样相关参数的调整
电源,220V,备24V直流蓄电池;流量调节,25~30L/min;空气压力,采样系统98~245kPa,电气系统为86.6~106.6kPa;采样时间,一次不得超过15min;采样高度,1.0~1.5m[2]。
③培养
同Andersen采样法。
参考文献
[1]吴冬柠,韦彩娇,余波.百色城区高校大学生宿舍空气微生物的监测与分析.右江民族医学院学报,2013,35(05):667-667.
[2]谈书勤,胡贵方,顾大勇.空气微生物气溶胶富集、检测与空气消毒技术研究进展.中国消毒学杂志,2012,29(12):1115-1120.
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微生物检验技术在感染控制中的应用
摘要:目的:对微生物检验技术在感染控制中的应用价值进行探讨和研究。
方法:选取我院2012年1月-2013年6月收治的尿路感染患者288例,经中段尿培养临床分离的大肠埃希氏菌288株,随机分成两组,每组144株,其中进行常规治疗的同时进行微生物检验的一组设为观察组,另一组只进行常规治疗设为比对组。对微生物检验的临床感染控制中的应用价值进行研究和探讨。
结果:观察组患者的感染率、感染程度均明显低于比对组患者,P<0.05,差异具有统计学意义。
结论:微生物检验对感染的发生率有明显的降低,对临床感染的控制和治疗有明显的提高,具有较好的临床价值,值得在临床中广泛推广和应用。
关键词:微生物检验感染控制监测
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2013)09-0470-02
随着现代医学技术的不断提高,许多化学药物治疗、介入性治疗和放射性治疗等在临床中的应用也日益广泛,而这些治疗容易引发耐药菌株的出现,导致医院感染的发生率逐年增高。患者在医院治疗的过程中,发生感染,并且出现感染的临床症状,这便是医院感染,这种感染一般情况下,具有一定的潜伏期,因此,只要患者的感染症状具备医院感染的范畴,都属于医院感染。医院感染已经成为医学领域亟待解决的重要问题,我院于2012年1月-2013年6月,选取收治的尿路感染患者288例,对微生物检验技术在感染控制中的临床应用效果进行研究,效果显著,现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料。选取2012年1月-2013年6月,我院收治的尿路感染患者288例,经中段尿培养临床分离288株大肠埃希氏菌,随机分成两组,每组144株。其中,男性患者156例,女性患者132例,年龄在2-58岁,平均年龄为(48.5±6.5)岁。住院时间平均(18.5±1.8)天。两组患者在年龄、性别和住院时间等临床资料都没有没有明显的差异,P>0.05,具有可比性。
1.2方法。观察组的144例患者采集的144株大肠埃希氏菌,采用微生物检验技术进行检测。具体操作如下:①采用ID32E试条,对大肠埃希氏菌标本进行纯菌种后,进行细菌鉴定;②采用ATB-5试条进行药敏实验;③检测时使用法国梅里埃半自动微生物分析仪进行;④采用K-B法进行确诊实验;⑤观察组患者根据检验结果进行药物治疗,比对组进行常规治疗。
1.3统计学处理。SPSS17.0软件;t检验;P<0.05,具有统计学意义。
2结果
观察组患者经过微生物检验结果显示,感染程度和感染率均低于比对组患者,P<0.05,具有统计学意义,详见表1和表2。
3讨论
随着各种化学药物治疗、介入性治疗以及放射性治疗、抗生素等在临床中的频繁应用,致使医院感染现象频发,发生率逐渐增高,严重影响着患者的健康,因此,对于医院感染的诊断势在必行。目前,诊断最为精确地方法是微生物检验技术,通过检验可以为医生提供更多,更准确的诊断信息,为医生制定进一步治疗的科学依据。尿路感染的诊断标准为:患者出现尿频、尿急和尿痛、以及尿不尽等现象,但是情况不严重,只是偶尔出现,尿液中细菌尿、血尿、气尿和脓尿等情况都只是微量的,患者也出现比较轻微的腰部酸痛,这种情况为轻度感染;患者出现经常性的尿频、尿急、尿痛和尿不尽,尿液中出现细菌尿、血尿、气尿和脓尿等现象比较多,患者出现腰部酸痛,但是还能够忍受,这种情况为中度感染;患者开始出现频繁的尿急、尿频、尿痛和尿不尽现象,患者甚至无法自身控制,尿液中细菌尿、血尿、气尿和脓尿等现象严重,患者腰部酸痛无法忍受,这种情况为重度感染。
微生物检验已经成为当前医学领域研究的重要方向,成为最重要的生命科学之一。通过微生物检验可以对临床感染进行有效的监测,指导进一步的临床感染的诊治,以及抗生素的合理使用。控制医院感染的重要途径,要从传染源、传播途径和易感人群三个方面进行,才能有效的控制感染的发生率。在医院里,不管是患者,还是医生、护士,甚至是医院的环境都可能是感染源,因此,医院要做好每天的消毒工作,不可忽视。医护人员也要注意个人卫生,经常洗手消毒,医疗器械等用品也要进行灭菌消毒,减少感染媒介。医院里聚集了多种病原体,病原体适合存活于潮湿的环境下,因此,要对医院的环境进行控制,保持空气畅通,降低医院感染发生率。另外,医院里的患者,身体都比较弱,容易感染,多为易感人群,因此,一定要在进行病房环境保持的同时,加强患者的病原菌的耐药性监测,以及环境细菌的监测。
本研究中,观察组采用微生物检测结果显示,不管是患者感染程度还是感染率都低于比对组,两组比较,P<0.05,具有统计学意义。可见,微生物检测在医院感染控制方面有明显的效果,能够对病原菌和易感人群进行有效的监测,同时,对传播途径也起到很好的预测作用。通过本研究,充分显示了微生物检验技术在感染控制中的应用作用,有着不可代替的位置,是进一步治疗的理论依据,有效降低了医院感染的发生率,具有显著的临床价值,值得在临床中广泛应用和推广。
参考文献
[1]武华,陈静,杨秀莲.微生物检验在医院感染控制中的价值分析[J].中国保健营养,2012,22(14):626-627
[2]王娟,曾芹,林锋,等.2009-2011年医院感染现患率调查与分析[J].中华医院感染学杂志,2012,22(12):2560-2562
[3]姜波,包志平.临床微生物检验与监测在医院感染中的意义[J].中华医院感染学杂志,2009,19(15):2047
[4]阔肖冬.加强临床微生物检验有效控制医院感染IJ].中国医药指南,2012,10(12):911-912
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